第843章 十三味解郁膠囊（3）

  劉良朋並沒有停下。

  他繼續說道：

  「還有，我們依據剛剛所說的剛發嗎，進行了成分特有性分析。

  發現三棱中含有較多的阿魏酸蔗糖酯和甘油酯的衍生物，此外還有自然界少見的異香豆素類成分。

  在三棱眾多活性成分中可體現出一定的專屬性，加之這些特徵性成分分別具有抗凝、抗炎和抗腫瘤活性，可作為三棱Q-marker篩選的重要參考指標。」

  這個發現，雖然不能夠說是開創性的，但是也的確是有奠基的作用的。

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  在沒有發現之前，人們對三棱全部集中在使用上面。

  而現在，人們可以把更多的精神用在探索上面。

  「人們可以把更多的精神用在探索上面。

  比如說，成分可測性分析。

  最近，有關三棱成分分析的研究正處於蓬勃發展的階段，我們利用比色法測總黃酮、總皂苷、總酚和總多糖的含量，採用滴定法測定甘露醇的含量。

  當然，我們也可以採用對照藥材探索薄層色譜條件的優化，採用高效液相色譜法和紫外分光光度法分別測定游離阿魏酸和總黃酮含量，採用氣質聯用法分析三棱揮髮油和脂肪酸類成分，利用HPLC進行三棱指紋圖譜研究等。

  目前，已採用HPLC法進行含量測定的三棱指標性成分有很多。

  包括p-香豆酸、阿魏酸、對羥基苯甲酸、香蘭素、對羥基苯甲醛、香草酸、蘆丁、山柰酚、芒柄花素、5-羥甲基糠醛、原兒茶酸、異阿魏酸、環-酪氨酸-亮氨酸、環-苯丙氨酸-苯丙氨酸。

  這些成分除5-羥甲基糠醛外均具有苯環結構，紫外檢測波長通常為254~320nm。

  但是嘛，現有研究尚且還存在很多的問題。

  首先，我們從現在業內了解，也從大家的含量測定結果來看，以上指標性成分在三棱中的含量總體偏低，除p-香豆酸、阿魏酸、對羥基苯甲酸、5-羥甲基糠醛外，其餘成分在絕大多數藥材中的含量低於百分之0.01。

  所以，我們建議對含量較低活性成分的檢測採用靈敏度更高方法比如液質聯用法。

  第二點，缺乏對三棱中特徵性成分，比如苯丙酸蔗糖酯、甘油酯類成分以及生物鹼的定量分析研究。

  第三點，對於三棱揮發性成分主要集中於MS定性檢測，需加強對其主要成分定量分析方面的研究。」

  劉良朋想了想之後，繼續說道。

  「在很多方面，中藥配伍環境分析臨床上三棱與莪朮兩者常相須合用。」

  「採用網絡藥理學方法分析三棱-莪朮相須配伍的功效物質發現，三棱中的芒柄花素、β-谷甾醇、豆甾醇為活性成分。

  鍾院長在建立了同時測定三棱-莪朮藥對中p-香豆酸、阿魏酸含量的HPLC法，且當三棱-莪朮質量比為2∶1時，p-香豆酸、阿魏酸含量最高。

  我們用石油醚提取藥對莪朮三棱和兩單味藥的脂溶性成分，經甲酯衍生化處理後進行GC-MS分析，發現藥對脂溶性成分與單味藥存在明顯差異。

  除了在三棱與藥對中共存的亞油酸甲酯、棕櫚酸甲酯外，三棱中其餘的主要脂肪酸成分，比如如油酸甲酯在藥對中未檢測到，而且藥對中共有23個新脂溶性成分產生，包括β-欖烯酮等。

  說明三棱與莪朮配伍後並不是成分和藥效的簡單相加，需要深入探討與配伍前後藥效變化相關的活性成分，為三棱Q-marker提供有益的參考。」

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  「另外，還有一種情況。」

  「不同加工炮製方法分析加工炮製直接影響著藥材的成分及藥效。」

  「三棱的歷代加工炮製方法包括去皮須、去毛、去蘆、切片、搗碎、火炮、紙煨、炒炭、醋炙、醋煮、米煮、酒煮、酒炒、烏頭炒、乾漆炒、面裹煨等，現代臨床上三棱一般經淨制、切制或醋炙後入藥。」

  「當然，我們與麩炒比較，醋炒三棱對家兔血小板體外聚集抑制率最高。」

  「鍾院長採用比色法測定不同炮製品中黃酮的含量，結果醋炒三棱的含量最高，比生品增加約40%。麩炒三棱的含量最低，比生品減少約50%。

  而另外醫生採用紫外分光光度法測定了三棱不同炮製品中總皂苷的含量，發現減壓冷浸後切制和醋炒樣品中總皂苷的含量與清蒸、麩炒相比更高。

  最後，我們採用GC-MS法分析發現，三棱經醋炙、醋蒸後的揮髮油含量較生品均有不同程度下降，具體成分種類也有所差異，產生了2個新組分即1，7，7-三甲基-[2，2，1]-2-庚醇乙酸酯和亞油酸乙酯。

  由此可見，炮製前後含量變化較大的是黃酮類、皂苷類和揮髮油類成分，因此可考慮為Q-marker的候選。」

  「還有，可入血化學成分分析。

  我們採用HPLC法建立了同時測定灌胃三棱後大鼠血清中對羥基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和蘆丁含量的方法，認為該檢測方法能夠同時、快速、準確測定三棱4種有效成分在血清中的含量。

  對羥基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和蘆丁即是三棱藥材中原有的主要成分。

  當然，這也是血中移行成分，口服藥物通常要經過胃腸吸收入血再經血液循環到達相應組織器官後方可發揮藥效。

  故而能在血液中檢測的對羥基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和蘆結語：三棱中含有苯丙素類、黃酮類、有機酸類、環二肽類、甾體類、生物鹼類及揮髮油等多種類型的活性成分。

  具有抗血小板聚集、抗血栓、抗凝、抗炎、抗腫瘤、鎮痛以及抗氧化等作用。目前，有關三棱的研究文獻中已報導作為含量測定指標的成分。

  其中，包括部分苯丙素類比如p-香豆酸、阿魏酸、異阿魏酸。

  黃酮類比如如蘆丁、山柰酚、芒柄花素。

  有機酸類比如如對羥基苯甲酸、香蘭素、對羥基苯甲醛、香草酸、原兒茶酸。

  環二肽類[如環-比如酪氨酸-亮氨酸和環-比如苯丙氨酸-苯丙氨酸。」

  劉良朋最後說道：「從有效性、可測性、配伍、傳遞與溯源比如加工與炮製、入血分析，苯丙素類、黃酮類、有機酸類成分為三棱Q-marker的必定之選。

  從特有性來看，阿魏酸、蘆丁和香草酸的專屬性不強，比如阿魏酸、蘆丁分別在藥材當歸、槐米中亦有較高的含量。

  然而，在三棱中首次發現的阿魏酸蔗糖酯和甘油酯類、異香豆素類以及生物鹼類成分尚無相關定量分析，故後續有待著重對三棱上述特徵性成分進行定量分析及藥理作用研究。

  由於三棱木化程度較高，所含成分含量通常較低[2]，應注意結合其各種活性成分的性質特點，優選可靠且靈敏高的分析方法，從而建立藥物使用者對十三味解郁膠囊的信任。」